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聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR)是分子生物學中基礎且廣泛應用的技術之一,用于特異性擴增目標DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素,但實驗的順利進行同樣高度依賴一系列專用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應效率和特異性,還直接關系到實驗的重復性...
酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)測定由切爾金斯基1983年。ELISPOT測定基于ELISA免疫測定的修改版本并由此發(fā)展而來。它是監(jiān)測人類和動物免疫反應的靈敏方法,也是準確定量分泌細胞因子的T細胞或抗體分泌B細胞的優(yōu)質(zhì)工具。如今,ELISPOT測定被廣泛用于生物醫(yī)學研究的各個領域,例如:自身免疫性疾病癌癥研究傳染病疫苗開發(fā)U-CyTechbiosciences是一家生物技術公司,于1999年與烏得勒支大學合作成立,位于荷蘭(歐洲)烏得勒支。公司提供不同格式的ELISA,ELIS...
phoreusbiotech正在開發(fā)各種策略來改善藥物的遞送和增加藥物的生物半衰期。為了解決這些問題,藥物輸送技術依賴于不同的納米級分子,包括:脂質(zhì)囊泡、病毒衣殼和納米顆粒。肽是許多這些納米材料的組成部分,并克服了與基于脂質(zhì)或病毒的遞送系統(tǒng)相關的一些限制,例如可調(diào)性、穩(wěn)定性、特異性、炎癥和抗原性。本綜述側重于自組裝形成囊泡/膠囊的生物基藥物遞送納米材料的演變。雖然脂質(zhì)囊泡在這些結構中最為突出;基于肽的結構正在出現(xiàn),特別是肽雙層分隔膠囊。新型生物材料支化兩親肽膠囊(BAPC)顯...
我們最近報道了一類新的支鏈兩親肽,它們與雙鏈DNA結合并促進真核細胞的體外轉染。在本研究中,我們測試了一種不同的配方,其中質(zhì)粒DNA與通過兩個支鏈兩親肽的自組裝形成的預制20-30nm陽離子膠囊的表面結合。在這些條件下,帶負電荷的DNA通過大量靜電相互作用與BranchedAmphiphilicPeptideCapsules(BAPC)的陽離子表面相互作用,生成大小范圍為50至250nm的肽-DNA復合物。BAPCs-DNA納米顆粒能夠將不同大小的質(zhì)粒DNA遞送到培養(yǎng)的細胞中...
支鏈兩親肽膠囊:兩種組成肽的不同比例直接決定不同的雙層結構、大小和DNA轉染效率支鏈兩親性肽膠囊(BAPC)是生物衍生的雙層分隔納米囊泡,能夠被各種溶質(zhì)包被或包封。囊泡及其貨物很容易被細胞吸收,并定位在細胞的核周區(qū)域。當BAPC與DNA混合時,BAPC充當陽離子成核中心,DNA圍繞其纏繞。BAPCs-DNA納米顆粒能夠在體內(nèi)和體外遞送質(zhì)粒DNA,產(chǎn)生高轉染率和最小的細胞毒性。BAPC與脂質(zhì)囊泡具有多種生物物理特性。然而,它們在尿素和氯化胍等離液物質(zhì)、陰離子洗滌劑、蛋白酶和高溫...
最近開發(fā)了一類自組裝支鏈兩親肽膠囊(BAPC),可用作新的藥物遞送載體。BAPCs在組裝過程中可以包封高達~12kDa的溶質(zhì),異常穩(wěn)定,并且容易被細胞毒性低的細胞吸收。粗粒度模擬支持BAPC由雙層定義,類似于二酰磷脂形成的雙層。在這里,進行了原子模擬以表征由三種支鏈兩親性肽(BAP)形成的雙層的結構和組織:雙(AcFLIVIGSII)-K-K4-CO-NH2,雙(Ac-CHA-LIVIGSII)-K-K4-CO-NH2和雙(Ac-FLIVI)-K-K4-CO-NH2。結果表明...
我們提供強有力的化學和生物物理證據(jù),證明已知在溶液中組裝成球形納米組件的支鏈兩親性肽(BAP)確實組裝為肽雙層分隔膠囊。這些納米組件被稱為支鏈兩親性肽膠囊。BAPC被細胞吸收并積聚在核周區(qū)域以持續(xù)存在而不會明顯降解。BAPCs還捕獲小蛋白質(zhì)和溶質(zhì),并穩(wěn)定地包封發(fā)射α粒子的放射性核素。我們設計了一種利用硫醇化學將這些肽序列偶聯(lián)到金納米顆粒(≤5nm)上的方法,目的是證明這些肽組裝成雙層。肽最初通過與金表面的相互作用組裝成單層半胱氨酸殘基在有機溶劑中的肽C末端。在過量肽存在下,這...
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